کیت BonisFiling™ 17-Plex v1.0

توضیحات

شناسایی STR انسانی با تکثیر هم‌زمان ۱۷ نشانگر در یک واکنش Multiplex PCR

کیت BonisFiling™ 17-Plex v1.0 یک کیت مبتنی بر Multiplex PCR است که برای شناسایی هویت انسانی، بررسی روابط خویشاوندی، پژوهش‌های ژنتیک قانونی و فرایندهای تضمین کیفیت آزمایشگاهی طراحی شده است.

این کیت امکان تکثیر هم‌زمان ۱۷ نشانگر ژنتیکی شامل ۱۵ جایگاه STR اتوزومی و دو نشانگر تعیین جنسیت Amelogenin و SRY را در یک واکنش PCR فراهم می‌کند. محصولات تکثیرشده دارای نشانگر فلورسنت، با استفاده از الکتروفورز موئینه  (Capillary Electrophoresis) جداسازی می‌شوند و Allelic ladder اختصاصی کیت، نام‌گذاری یکنواخت آلل‌ها و تحلیل پروفایل STR را تسهیل می‌کند.

صرفاً برای مصارف تحقیقاتی (RUO)؛ برای استفاده در روش‌های تشخیصی طراحی نشده است.

 الکتروفروگرام  حاصل از تکثیر ۱۰ نانوگرم DNA کنترل M9276 با استفاده از کیت BonisFiling™ 17-Plex v1.0.

ویژگی‌های برجسته محصول

• تکثیر هم‌زمان ۱۷ نشانگر در یک واکنش Multiplex PCR
• شامل ۱۵ جایگاه STR اتوزومی به همراه Amelogenin و SRY
• حجم نهایی واکنش PCR برابر با ۲۰ میکرولیتر
• طراحی بهینه پرایمرها با هدف کاهش تشکیل پرایمر-دایمر و محصولات غیراختصاصی
• طراحی اختصاصی پرایمرها برای کمک به آدنیلاسیون کامل و ایجاد پروفایل‌های آللی واضح
• دارای Allelic Ladder اختصاصی برای نام‌گذاری استاندارد آلل‌ها
• همراه با DNA کنترل و Matrix Standard جهت کنترل عملکرد و کالیبراسیون طیفی
• سازگار با دستگاه‌های متداول الکتروفورز موئینه Applied Biosystems
• قابل ارائه در بسته‌بندی‌های ۲۵ و ۵۰ واکنشی

طراحی‌شده برای آنالیز دقیق و تکرارپذیر STR

پنل جامع ۱۷ نشانگری

کیت 17Plex™BonisFiling تعداد ۱۵ جایگاه STR اتوزومی را همراه با دو نشانگر تعیین جنسیت در یک واکنش ترکیب می‌کند و فرایندی کارآمد برای تهیه پروفایل DNA انسانی در اختیار آزمایشگاه قرار می‌دهد.

واکنش Multiplex بهینه‌شده

سامانه پرایمری کیت با هدف کاهش برهم‌کنش‌های غیراختصاصی، تشکیل پرایمر-دایمر، ایجاد پیک‌های دوگانه و سایر آرتیفکت‌های تکثیری طراحی شده است. رعایت دستورالعمل پیشنهادی به ایجاد الکتروفروگرام‌های واضح و نتایج ژنوتایپی تکرارپذیر کمک می‌کند.

نام‌گذاری استاندارد آلل‌ها

یک اللیک لدر اختصاصی همراه کیت ارائه می‌شود که امکان تعیین و نام‌گذاری آلل‌ها را در تمام جایگاه‌های موجود در پنل فراهم می‌کند.

اجزای یکپارچه کنترل کیفیت

یک نمونه کنترل DNA با پروفایل STR مشخص،  برای پایش عملکرد تکثیر و آنالیز در اختیار آزمایشگاه قرار می‌گیرد. همچنین BDS-5^TM Matrix Standard  نیز برای کالیبراسیون طیفی و تفکیک صحیح سیگنال‌های فلورسنت مورد استفاده در تست طراحی شده است.

کاربردها

کیت BonisFiling™ 17-Plex v1.0 برای پشتیبانی از کاربردهای زیر طراحی شده است:

• شناسایی هویت انسانی
• بررسی نسبت خویشاوندی و والد-فرزندی
• پژوهش‌های ژنتیک قانونی
• تهیه پروفایل از نمونه‌های مرجع
• آموزش و توسعه روش‌های آزمایشگاهی
• مطالعات کنترل و تضمین کیفیت داخلی

هر آزمایشگاه باید عملکرد کیت را در محیط کاری خود اعتبارسنجی کرده و آستانه‌های تحلیلی، معیارهای تفسیر و دستورالعمل‌های اجرایی مناسب را تعیین کند.

• پنل نشانگرهای STR

  کانال فلورسنت	نشانگرها
  FAM	TH01,  D21S11,  D5S818, D18S51,  D2S1338
  HEX	vWA,  D13S317,  D16S539, CSF1PO, D3S1358
  TAMRA	SRY,  Amelogenin,  D7S820,  D8S1179,  TPOX, FGA,  D19S433

   

  در مرحله الکتروفورز موئینه باید از استاندارد اندازه داخلی نشاندارشده با LIZ و سازگار با سامانه استفاده شود.

  مراحل کلی انجام آزمون

  • آماده‌سازی نمونه DNA خالص‌شده
  • آماده‌سازی واکنش ۲۰ میکرولیتری Multiplex PCR
  • تکثیر نشانگرهای STR مطابق پروتکل
  • آماده‌سازی محصولات PCR با فرمامید و Size standard
  • جداسازی قطعات فلورسنت با الکتروفورز موئینه
  • تعیین اندازه قطعات و نام‌گذاری آلل‌ها با استفاده Allelic ladder و پنل اختصاصی

  سازگاری با تجهیزات آزمایشگاهی

  دستگاه‌های ترموسایکلر

  عملکرد آزمون با دستگاه‌های زیر ارزیابی شده است:

  • Applied Biosystems Veriti™ Thermal Cycler
  • Applied Biosystems MiniAmp™ Thermal Cycler

  آزمایشگاه‌هایی که از مدل های دیگری از ترموسایکلر استفاده می‌کنند باید شرایط تکثیر را در محیط کاری خود اعتبارسنجی و در صورت نیاز بهینه‌سازی کنند.

  آنالایزرهای ژنتیکی

  این کیت برای استفاده با آنالایزرهای ژنتیکی پنج رنگ طراحی شده است، از جمله:

  • ABI PRISM® 3130 و 3130xl
  • Applied Biosystems® 3500 و 3500xL

  تحلیل داده‌ها

  تعیین اندازه قطعات و تحلیل STR را می‌توان با استفاده از  نرم‌افزارهایی مانند GeneMapper™ ID-X و GeneMarker® انجام داد . برای انالیز داده های کیت ™BonisFiling-17plex توصیه میشود از سایز استاندارد GeneScan™ 500 LIZ™ یا نمونه تجاری معادل آن استفاده شود.

  اجزای کیت

  جزء کیت	بسته ۲۵ واکنشی	بسته ۵۰ واکنشی
  Bon-AmpMix	۲۷۵ میکرولیتر	۲ × ۲۷۵ میکرولیتر
  Bon-PMix	۱۹۵ میکرولیتر	۲ × ۱۹۵ میکرولیتر
  Allelic Ladder v1.0	۱۵ میکرولیتر	۲ × ۱۵ میکرولیتر
  BDS-5 TM Matrix Standard	۲۰ میکرولیتر	۲۰ میکرولیتر
  Control DNA M9276	۲۰ میکرولیتر	۲۰ میکرولیتر

   

  مشخصات فنی

  مشخصه	توضیحات
  فناوری	Fluorescent Multiplex PCR, Capillary electrophoresis
  تعداد کل نشانگرها	۱۷
  جایگاه‌های STR اتوزومی	۱۵
  نشانگرهای تعیین جنسیت	Amelogenin و SRY
  حجم واکنش PCR	۲۰ میکرولیتر
  کانال‌های فلورسنت	FAM، HEX و TAMRA
  تعداد واکنش	۲۵ یا ۵۰ واکنش
  کاربرد موردنظر	صرفاً مصارف تحقیقاتی

   

  شرایط نگهداری و جابه‌جایی

  تمام اجزای کیت باید مطابق شرایط درج‌شده در راهنمای کاربری نگهداری شوند. معرف‌های فلورسنت را در برابر نور محافظت کرده و از چرخه‌های غیرضروری انجماد و ذوب جلوگیری کنید. پیش از مصرف، برچسب هر جزء و مستندات همراه محصول را بررسی نمایید.

  اطلاعات سفارش

  بسته ۲۵ واکنشی: BTG-BF17-25

  بسته ۵۰ واکنشی: BTG-BF17-50

  برای دریافت پیش‌فاکتور، اطلاعات فنی یا مشاوره درباره راه‌اندازی کیت BonisFiling™ 17-Plex در آزمایشگاه خود با شرکت بنیان تشخیص ژن تماس بگیرید.

  اطلاعات مهم درباره کاربرد محصول

  کیت BonisFiling™ 17-Plex صرفاً برای مصارف تحقیقاتی (RUO) و استفاده توسط کارکنان آموزش‌دیده و واجد صلاحیت آزمایشگاهی در نظر گرفته شده است. این محصول برای تشخیص، پیشگیری، درمان، شناسایی یا پایش اختلالات ژنتیکی، ناهنجاری‌های کروموزومی یا سایر شرایط بالینی طراحی نشده است.

  تفسیر نتایج باید توسط افراد واجد صلاحیت و مطابق روش‌های اعتبارسنجی‌شده آزمایشگاه و دستورالعمل‌های مرتبط انجام شود. هر آزمایشگاه مسئول اعتبارسنجی داخلی کیت و تعیین روش‌های مناسب کنترل کیفیت برای کاربرد موردنظر خود است.